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为了进一步了解大麦育种和遗传学,需要在分析每个基因突变的基础上获得更多关于基因功能信息。然而,大麦突变体资源的开发与拟南芥和水稻等模式植物相比,稍显逊色。虽然基因组编辑技术已经能够产生突变体,但由于该方法仅适用于有限数量的品种转化,因此不是一种有效的产生突变体的方法。
Waxy基因单核苷酸多态性(SNPs)的定位
农杆菌介导的重组CELI蛋白在烟草中的瞬时表达
本文利用“Mannenboshi”开发了一个突变体种群,该种群可高产优质品质的谷物,但易受病害影响,从而建立靶向诱导基因组局部病变(TILLING)系统,该系统可高通量分离突变体。为了评估8043m3株系的可用性,我们用一种快速、可视的蜡质表型作为指标来研究突变发生的频率。在Waxy基因中分离出4个突变体,并鉴定出新的等位基因单核苷酸多态性(SNPs)。结果证实了使用错配核酸内切酶CELI可以容易地检测到突变,这表明可以从TILLING群体中快速分离出足够数量的突变体。
用纯化的重组CELI-endon裂解异源双链DNA检测Waxy基因突变
来源:
Kawamoto Y, Toda H, Inoue H, et al. Fast and Inexpensive Phenotyping and Genotyping Methods for Evaluation of Barley Mutant Population. Plants 2020, 9(9), 1153; https://doi.org/10.3390/plants9091153.
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